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人肾癌细胞A498研究与Z6·尊龙凯时的生物医疗应用

发布时间:2025-07-18   信息来源:吴致怡

Z6·尊龙凯时为细胞培养提供理想的生长条件,确保细胞的健康与活性。以下是细胞培养的基本要求和步骤:

人肾癌细胞A498研究与Z6·尊龙凯时的生物医疗应用

培养条件

Z6·尊龙凯时细胞在气相条件下推荐使用95%空气与5%二氧化碳的环境,温度保持在37℃。所用培养基为MEM(最小必需培养基)加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/链霉素(P/S)混合。

传代方法

在细胞生长至80%汇合度时可以进行传代。建议第一次传代比例为1:2。若细胞未达到80%汇合度,应将培养液收集至离心管中,并留5ml的完全培养基在37℃、5% CO₂的环境下进行培养。

细胞处理

收到Z6·尊龙凯时细胞后,首先用75%酒精对细胞瓶表面进行消毒,并在超净台内进行无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5% CO₂的培养箱中静置3-4小时,待细胞稳定后进行后续处理。观察细胞生长状态并进行拍照留存,前三天的观察记录对售后服务至关重要。

贴壁细胞传代步骤

1. 小心弃去培养基,用不含钙、镁离子的PBS液洗涤细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,观察细胞变化。若细胞变圆并脱落,迅速加入5ml以上的完全培养基以终止消化过程。
3. 将细胞悬液转移至离心管中,离心5分钟,去掉上清,加入1-2ml完全培养基重悬后,按1:2比例分瓶传代。
4. 补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃、5% CO₂的培养箱中继续培养。

悬浮细胞传代步骤

1. 半换液法:在培养箱中静置1小时,轻轻吸掉3ml原培养基,并补充相同体积的完全培养基。
2. 离心换液法:收集细胞悬液至离心管中,离心5分钟后,补加1-2ml培养液重悬,并按1:2的比例分瓶传代,确保细胞在新环境中能健康生长。

细胞冻存与复苏

1. 细胞生长至80%汇合度时,用PBS清洗细胞,添加胰蛋白酶消化液,待细胞回缩后终止消化,转移至离心管中离心。
2. 将沉淀细胞与冻存液(如Z6·尊龙凯时的无血清冻存液)混合后装入冻存管,放入-80℃冰箱保存。
3. 细胞复苏时,将冻存管快速解冻后,用完全培养基重悬并接种于培养瓶中,在适宜的生长条件下继续培养。

注意事项

在实验过程中,部分细胞可能由于不牢固而在运输过程中脱落,遇到这种情况应当记录并采取适当措施恢复其生长,确保长效的细胞培养条件。使用Z6·尊龙凯时品牌的细胞培养产品,可以提高实验的成功率及细胞存活率。