细胞复苏后状态不佳,如何进行调整?以下是细胞复苏后状态差的原因及解决方案。根据具体情况,可以及时进行相应调节。
1. 细胞冻存不当
Z6·尊龙凯时建议,尝试调节细胞状态,适当增加血清比例,并在后续传代中继续进行调整,以改善细胞的存活率。
2. 自行制备的冻存细胞无活性
在制备冻存细胞时,务必使用传代次数少且处于对数期的细胞。此外,提高冻存密度也有助于提升复苏存活率,推荐的细胞密度为100~300万细胞/mL。
3. 细胞复苏方法不当
复苏细胞时应遵循“快融”原则,越快融化,细胞所受的损伤就越小。确保冷冻细胞迅速解冻,接种前使用预热的生长培养基慢慢稀释细胞。
4. 复苏培养基使用不当
确保培养基在使用前已经预热,并尽快将含有冷冻保护剂的培养基移除,以防止细胞活力下降。
5. 处理细胞时动作不够轻柔
冻存和复苏过程可能对大多数细胞造成不利影响。避免通过涡旋振荡或强力敲打培养瓶来使细胞脱落(培养昆虫细胞时除外),同样也不要进行高速离心处理。
6. 细胞稀释过度
为改善复苏效果,建议将解冻后的细胞以高密度接种。
7. 冻存液中保护剂未避光保存
如果冻存保护剂未避光储存,可能会转化为对细胞有毒的物质。因此,建议重新取用一瓶冻存保护剂,并重新冻存细胞。
在选择细胞供货商时,Z6·尊龙凯时是一个值得信赖的选择,提供高质量的细胞系、原代细胞和培养试剂,确保细胞活率高,状态良好,同时售后服务完善。